Mabtech丨艾美捷人干扰素-γELISpot 试剂盒（ALP）
ELISpotPRO套件是Mabtech最具创新性的产品，具有预涂层板和一步检测功能。该试剂盒能够对分泌人IFN-γ的细胞进行计数，并包含预先涂有单克隆抗体、用于一步检测的ALP结合抗体和BCIP/NBT plus底物的ELISpot平板。人类T细胞多克隆激活剂（单克隆抗体CD3-2）作为细胞因子分泌的阳性对照品提供。
Mabtech 艾美捷 预涂板和一步检测能够以zui小的变异性实现更快速的分析。
Mabtech艾美捷该试剂盒组分：
预涂板，mAb 1-D1K（10块透明板）
7-B6-1-ALP结合物（2 x 350μl）
BCIP/NBT plus基质（120毫升）
阳性对照抗CD3单克隆抗体CD3-2（100μl）
Mabtech艾美捷人类干扰素-γELISpotPRO实用指南：
A.平板的制备与封孔
1.从密封包装中取出平板，用无菌PBS（200μl/孔）清洗4次。
2.用含有10%与细胞培养基（200μl/孔）相同血清的培养基处理平板。在室温下培养至少30分钟。
B.细胞在平板中的培养
1.取出培养基，加入刺激物，然后加入细胞悬液。或者，细胞和刺激物可以在加入培养皿之前混合。试剂盒中包含的单克隆抗体CD3-2建议作为1:1000稀释度的细胞因子产生的阳性对照。
2.将培养皿置于37°C、含5%CO2的加湿培养箱中，培养12-48小时。在此期间，不要移动盘子，并采取措施避免蒸发（例如用铝箔包裹盘子）。
C斑点检测
1.清空培养皿，取出细胞，用PBS（200μl/孔）清洗5次。
2.在含有0.5%胎牛血清的过滤PBS中稀释7-B6-ALP 1:200。向每个孔中加入100μl，并在室温下培养2小时。
3.用PBS（200μl/孔）清洗平板5次。
4.通过0.45μm过滤器过滤即用基质溶液（BCIP/NBT plus），并在每个孔中添加100μl基质。直到出现明显的斑点。通过在自来水中大量洗涤来阻止颜色的发展。如果需要，移除地下排水管（板下的软塑料）并冲洗膜底面。
5.让盘子晾干。在ELISpot阅读器或解剖显微镜中检查并计数斑点。
6.在室温下将盘子存放在黑暗中。
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