唾液RNA提取注意事项

产品特点

◎提取RNA纯度高，无抑制剂，A260/A280为1.8-2.0；

◎产率高，同样的样本量提取的RNA更多；

◎可用于唾液样本中RNA的提取，提取后的RNA可用于核酸检测使用；

◎可用于中量（0.5-1.5mL）唾液样本中RNA的提取；

◎不含苯酚和氯仿等有毒溶剂，安全无毒。

产品介绍

BIOG RNA Saliva Kit是常州百代生物科技有限公司研制的专门用于提取中量（0.5-1.5mL）唾液的RNA的试剂盒。BIOG RNA Saliva Kit采用了最新的优质进口离子膜，裂解液和洗脱液经过多次优化，能高效地分离RNA。提取得到的RNA较其它品牌的同类试剂盒产量更大，纯度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染，可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。

操作步骤

1. 请自行准备：无水乙醇、无RNA酶15 mL离心管、无RNA酶20 mL离心管。

2. 取出析出液和洗涤液，按以下操作：

a) 洗涤液A：22.4mL加入9.6mL无水乙醇，混匀；44.8mL加入19.2mL无水乙醇，混匀。

b) 洗涤液B：9.6mL加入22.4mL无水乙醇，混匀；19.2mL加入22.4mL无水乙醇，混匀。

c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。

3. 取1.5mL唾液至20ml离心管中，加入20μL RNA Carrier混合均匀，加入1.5ml 裂解液及100μL 消化液，振荡混匀，56℃水浴10 分钟。

4. 加入6mL无水乙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。

5. 将吸附柱放入收集管内，将4560μL上述溶液转入吸附柱内，静置2 分钟，5,000 rpm 4℃离心2 分钟，弃收集管内废液；

6. 将吸附柱放回收集管内，将剩余4560μL溶液转移至吸附柱内，重复步骤5。

7. 将吸附柱放回收集管内，加2500μL 洗涤液A至吸附柱内，5,000 rpm 4℃离心2 分钟，弃收集管内废液。

8. 将吸附柱放回收集管内，加2500μL 洗涤液B至吸附柱内，静置2分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

9. 将吸附柱放回收集管内，5,000 rpm 4℃离心2 min，离去残留的洗涤液。

10. 取出吸附柱，放入新的15 mL离心管内，加入150-300 μL 洗脱液，静置3 min，5,000 rpm 4℃ 离心3 min，收集RNA溶液。提取的RNA即可用于下一步实验或-70℃保存。

注意事项：

1.由于RNA容易降解，提取实验所用器具应除去RNA酶，实验过程中最好戴一次性洁净手套、口罩，提取的RNA溶液可适当加入RNA保护因子（货号：51090，一般50μLRNA溶液加入2μL。）

2.裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。

3. 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象，置于37℃水浴中溶解即可。