原核表达载体如何选择？-卡梅德生物

卡梅德生物小编报道：
在重组蛋白原核表达系统中，选择合适的载体是至关重要的，因为它直接影响到目的蛋白的表达水平、可溶性以及纯化难易程度。以下是几种常用的原核表达载体及各载体的特点
1 pET系列载体：这是最常用的一类载体，属于T7lac启动子系统。pET载体具有高拷贝数、易分离、对宿主细胞无毒害等特点。这类载体允许在大肠杆菌中高水平表达融合蛋白，并且可以通过简单的亲和层析纯化。
2 pGEX系列载体：这是用于表达融合到谷胱甘肽S-转移酶(GST)的重组蛋白的载体。谷胱甘肽S-转移酶是一种广泛存在于各种生物体内的多功能酶，它能催化多种还原型谷胱甘肽的氧化反应。将外源基因克隆到pGEX载体上，可实现高效表达。
3 pBAD和p araB系列载体：这些载体使用 araB 操纵子，可以用来在缺乏丙氨酸解氨酶的大肠杆菌突变株中，通过L-丙氨酸诱导目的基因的表达。
4 pUNCH载体：这是一种非溶源性表达载体，可以在大肠杆菌中实现高水平表达，并且可以通过一步亲和层析进行纯化。
5 pTriEx系列载体：这是Novagen公司开发的一种具有多种功能的载体，可以在大肠杆菌中实现可溶性表达，并且可以方便地进行亲和层析和离子交换层析等纯化操作。
选择载体时需考虑的因素包括：表达水平、可溶性、纯化难易程度、稳定性以及安全性等。此外，还应考虑宿主菌的特性、培养条件以及生产成本等因素。